مصنوعات

Beta-D-2'-deoxy-2'-fluoro-2'-C-methylcytidine (PSI-6130) Huh-7 ریپلکن سیلز میں ہیپاٹائٹس سی وائرس (HCV) RNA کی ترکیب کا ایک طاقتور مخصوص روک تھام کرنے والا ہے۔HCV NS5B RNA پولیمریز کو روکنے کے لیے، PSI-6130 کو 5'-ٹرائی فاسفیٹ فارم میں فاسفوریلیٹ ہونا چاہیے۔PSI-6130 کے فاسفوریلیشن اور HCV NS5B کی روک تھام کی تحقیقات کی گئیں۔PSI-6130 کے فاسفوریلیشن کو ریکومبیننٹ ہیومن 2'-deoxycytidine kinase (dCK) اور uridine-cytidine kinase 1 (UCK-1) کے ذریعے ایک جوڑے سپیکٹرو فوٹومیٹرک رد عمل کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔PSI-6130 کو پیوریفائیڈ ڈی سی کے کے لیے ایک سبسٹریٹ دکھایا گیا تھا، جس میں 81 مائیکرو ایم کا کلومیٹر اور 0.007 s-1 کا ایک kcat تھا، لیکن UCK-1 کا سبسٹریٹ نہیں تھا۔PSI-6130 monophosphate (PSI-6130-MP) کو بالترتیب دوبارہ پیدا ہونے والے انسانی UMP-CMP کناز اور نیوکلیوسائیڈ ڈائی فاسفیٹ کناز کے ذریعہ ڈائی فاسفیٹ اور اس کے بعد ٹرائی فاسفیٹ کو مؤثر طریقے سے فاسفوریلیٹ کیا گیا تھا۔جنگلی قسم اور تبدیل شدہ (S282T) HCV NS5B RNA پولیمریزس کی روک تھام کا مطالعہ کیا گیا۔جنگلی قسم کے انزائم کے ساتھ PSI-61 30 ٹرائی فاسفیٹ (PSI-6130-TP) کے لیے مستحکم ریاست کی روک تھام کا مستقل (Ki) 4.3 مائیکرو ایم تھا۔اسی طرح کے نتائج 2'-C-میتھیلاڈینوسین ٹرائی فاسفیٹ (Ki = 1.5 مائیکرو ایم) اور 2'-C-methylcytidine triphosphate (Ki = 1.6 microM) کے ساتھ حاصل کیے گئے تھے۔S282T اتپریورتن کے ساتھ NS5B، جو 2'-C-methyladenosine کے خلاف مزاحمت فراہم کرنے کے لیے جانا جاتا ہے، PSI-6130-TP نے جنگلی قسم کی طرح مؤثر طریقے سے روکا تھا۔PSI-6130-MP کو RNA میں پیوریفائیڈ NS5B RNA پولیمریز کے ذریعے اتپریرک کرنے کے نتیجے میں سلسلہ ختم ہو گیا۔