مصنوعات

1. میٹابولائٹ پروفائلنگ کے طریقے حیاتیاتی نظاموں میں میٹابولائٹ پولز کی پیمائش کے لیے اہم ٹولز ہیں۔اگرچہ میٹابولائٹ پروفائلنگ کے زیادہ تر طریقے متعلقہ شدت کی اطلاع دیتے ہیں یا تمام میٹابولائٹس کی نمائندگی کرنے والے چند داخلی معیارات پر انحصار کرتے ہیں، حیاتیاتی خلیات اور سیالوں میں میٹابولائٹ پول کی مقداری وضاحت کے لیے حتمی ضرورت مطلق ارتکاز کا تعین ہے۔ہم یہاں ایک اعلی تھرو پٹ اور حساس گیس کرومیٹوگرافی/ٹینڈم ماس اسپیکٹومیٹری (GC/MS/MS) ٹارگٹڈ میٹابولائٹ پروفائلنگ کے طریقہ کار کی اطلاع دیتے ہیں جس سے تمام دریافت شدہ میٹابولائٹس کی قطعی مقدار کا تعین ہوتا ہے۔یہ طریقہ میتھائل کلوروفارمیٹ ڈیریویٹائزیشن پر مبنی ہے اور میٹابولائٹ کے معیارات کے ساتھ نمونوں کو الگ کرکے ڈیوٹریٹڈ ڈیریویٹائزیشن ریجنٹس کے ساتھ اخذ کیا گیا ہے۔روایتی الیکٹران امپیکٹ آئنائزیشن کو مثبت کیمیکل آئنائزیشن سے بدل دیا جاتا ہے کیونکہ مؤخر الذکر بہت زیادہ حد تک سالماتی آئن اور دیگر اعلی مالیکیولر وزن کے ٹکڑوں کو محفوظ رکھتا ہے۔اس نے بہت سے کوئلیوٹنگ میٹابولائٹس کے درمیان منفرد MS/MS ٹرانزیشنز کو منتخب کرنا آسان بنا دیا۔فی الحال، ناول GC/MS/MS طریقہ 67 عام پرائمری میٹابولائٹس پر مشتمل ہے جن میں سے زیادہ تر کا تعلق امینو اور نانامنو آرگینک ایسڈ کے گروپوں سے ہے۔ہم پیشاب اور سیرم کے نمونوں پر طریقہ کار کا اطلاق ظاہر کرتے ہیں۔یہ طریقہ امینو ایسڈز اور نانامینو آرگینک ایسڈز کی مقداری GC/MS میٹابولائٹ پروفائلنگ کے لیے موجودہ طریقہ کار میں نمایاں بہتری ہے۔

2.24S-Hydroxycholesterol (24OHC) اور 27-hydroxycholesterol (27OHC) دو ساختی طور پر ملتے جلتے آکسیسٹرول ہیں جو کہ مختلف ماخذ ہیں - پہلے تقریباً خصوصی طور پر دماغ میں بنتے ہیں اور مؤخر الذکر دماغ میں کم حد تک دوسرے اعضاء کے مقابلے میں بنتے ہیں۔قیاس کا تجربہ کیا جانا ہے: اعصابی نقصان اور/یا ڈیمیلینیشن دماغ سے سیریبرو اسپائنل فلوئڈ (CSF) میں 24OHC کے بہاؤ میں اضافے کا سبب بنتا ہے، جبکہ خون دماغی رکاوٹ CSF-Isotope dimastope میں گردش سے 27OHC کے بڑھنے کا سبب بنتی ہے۔ مختلف اعصابی اور جراثیمی امراض کے 250 سے زیادہ مریضوں سے CSF اور پلازما میں دو آکسیسٹرول کی جانچ کرنے کے لیے سپیکٹرومیٹری کا استعمال کیا گیا تھا۔ دو آکسیسٹرولز کے CSF کی سطح پلازما کی سطح سے مختلف بیماریوں سے بہت زیادہ متاثر ہوئی تھی۔فعال demyelinating بیماریوں کے ساتھ مریضوں نے CSF میں نسبتا زیادہ 24OHC/27OHC تناسب کے ساتھ 24OHC کی سطح میں اضافہ کیا تھا۔عام طور پر گردن توڑ بخار کے مریضوں میں 24OHC/27OHC تناسب کے ساتھ دونوں سٹیرائڈز کی اعلی سطح ہوتی ہے۔الزائمر کی بیماری کے مریضوں نے 27OHC میں کم اضافے کے ساتھ CSF میں 24OHC کی سطح میں قدرے اضافہ کیا۔ایک سے زیادہ سکلیروسیس کے مریضوں میں فعال ادوار کے دوران 24OHC کی اعلی سطح رکھنے کا رجحان ایک اعلی 24OHC/27OHC تناسب کے ساتھ ہوتا ہے۔ CSF اور پلازما میں دو آکسیسٹرول کی پیمائش اعصابی بیماریوں کی تشخیص کے لیے موجودہ حیاتیاتی کیمیائی طریقوں میں نمایاں اضافہ کر سکتی ہے۔