مصنوعات

بیک وقت اتپریورتنوں کے اثرات انزیمیٹک سرگرمی کو تبدیل کرنے کے لیے جس طریقے سے یکجا ہوتے ہیں اس کا آسانی سے اندازہ نہیں لگایا جا سکتا کیونکہ یہ اثرات ہمیشہ لکیری انداز میں اضافی نہیں ہوتے ہیں۔لہذا، امینو ایسڈ کی باقیات کے بیک وقت اتپریورتنوں کے اثرات کی خصوصیت جو سبسٹریٹ کو باندھتی ہے، انزائمز کی سبسٹریٹ کی خصوصیت کو سمجھنے میں اہم کردار ادا کر سکتی ہے۔Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) سے beta-glycosidase میں، Q39 اور E451 دونوں باقیات سبسٹریٹ کے ساتھ تعامل کرتے ہیں اور یہ سبسٹریٹ کی مخصوصیت کی وضاحت کے لیے ضروری ہے۔Sfbetagly (A451E39، S451E39 اور S451N39) کے دوہرے اتپریورتنوں کو سائٹ سے ہدایت شدہ mutagenesis کے ذریعہ تیار کیا گیا تھا، جس کا اظہار بیکٹیریا میں کیا گیا تھا اور affinity chromatography کا استعمال کرتے ہوئے پاک کیا گیا تھا۔ان انزائمز کی خصوصیات p-nitrophenyl beta-galactoside اور p-nitrophenyl beta-fucoside کو بطور ذیلی ذخائر استعمال کرتے ہوئے کی گئی تھیں۔Q39 اور E451 پوزیشنوں پر سائٹ ڈائریکٹڈ میوٹیشنز پر مشتمل Sfbetagly کے سنگل اور ڈبل اتپریورتیوں کے لیے k cat/km تناسب یہ ظاہر کرنے کے لیے استعمال کیا گیا کہ ڈبل میوٹیشنز (Gdouble) کے ESdouble خنجر (انزائم-ٹرانزیشن اسٹیٹ کمپلیکس) کی آزاد توانائی پر اثر daggerxy) واحد تغیرات (Gdouble daggerx اور Gdouble daggery) کے نتیجے میں ہونے والے اثرات کا مجموعہ نہیں ہے۔Gdouble خنجر میں یہ فرق اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ واحد تغیرات کے اثرات جزوی طور پر اوورلیپ ہوتے ہیں۔لہذا، یہ عام اثر Gdouble daggerxy میں صرف ایک بار شمار ہوتا ہے۔بیٹا گلائکوسیڈیسس پر کرسٹاللوگرافک ڈیٹا بائیڈنٹیٹ ہائیڈروجن بانڈ کی موجودگی کو ظاہر کرتا ہے جس میں باقیات Q39 اور E451 اور سبسٹریٹ کے اسی ہائیڈروکسیل گروپ شامل ہیں۔لہذا، تھرموڈینامک اور کرسٹللوگرافک ڈیٹا دونوں تجویز کرتے ہیں کہ باقیات Q39 اور E451 سبسٹریٹ کے ساتھ اپنے متعلقہ تعاملات پر باہمی اثر ڈالتے ہیں۔