مصنوعات

فلوروسین اور فلوروسین میتھائل ایسٹر کے مونوگالیکٹوپیرانوسائڈس: ترکیب، بائیوٹنیلیٹڈ β-galactosidase کے ذریعہ انزیمیٹک ہائیڈولیسس، اور ٹرانسلیشنل ڈفیوژن گتانک کا تعین

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) اور d-glucopyranoside) اور ان کے میتھائل ایسٹر (MFMG) کو اچھی پیداوار میں acetobromoglucose/galactose اور fluorescein methyl ester سے تیار کیا گیا ہے۔galacto مشتقات کے Enzymatic hydrolysis تجربات (biotinylated β-galactosidase کا استعمال کرتے ہوئے) کئے گئے ہیں اور متحرک پیرامیٹرز کا حساب لگایا گیا ہے۔ہائیڈولیسس کے دوران فلوروسینس کی شدت میں 15-20 گنا اضافہ دیکھا گیا ہے۔کم وقت اور سبسٹریٹ کی کم ارتکاز میں فلوروسینس میں ایک لکیری اضافہ نوٹ کیا گیا ہے، جس سے یہ مرکبات galactosidases کے لیے مفید اور حساس تحقیقات بنتے ہیں۔MFMG کے لیے Michaelis–Menten constant (Km) ویلیو کی شدت FMG سے زیادہ ہے جو فلوروجینک سبسٹریٹ کی ممکنہ تبدیلی کی تجویز کرتی ہے۔FMG کے ساتھ بایوٹینیلیٹڈ β-Gal کے لیے کلومیٹر کی قدر مقامی انزائم کے مقابلے میں کم ہے۔یہ مشاہدہ مقامی انزائم کے مقابلے میں بایوٹینیلیٹڈ انزائم کی اعلی سبسٹریٹ وابستگی کی نشاندہی کرتا ہے۔فلوروجینک سبسٹریٹس اور دونوں پروڈکٹس کے لیے ٹرانسلیشنل ڈفیوژن گتانک کی پیمائش کی گئی ہے، جس میں فلوروسینس کوریلیشن سپیکٹروسکوپی کا استعمال کیا گیا ہے۔فلوروجینک سبسٹریٹس اور انزیمیٹک ہائیڈولیسس پروڈکٹس کے لیے ٹرانسلیشنل ڈفیوژن گتانکوں کو 3.5–4.5 × 10−10 m2 s−1 کی حد میں ایک جیسا ناپا گیا ہے۔اس طرح سبسٹریٹ اور پروڈکٹ کی ترجمے کی نقل و حرکت میں فرق کی وجہ سے انزیمیٹک حرکیات میں اضافہ یا پسماندگی اتنا واضح نہیں ہے۔