مصنوعات

70% سے زیادہ کم درجے کے گلیوماس میں آئسائٹریٹ ڈیہائیڈروجنیز 1 (IDH1) کے لیے جین کوڈنگ میں ہیٹرو زائگس R132H اتپریورتن ہوتا ہے۔یہ انزائم کو α-ketoglutarate کو 2-hydroxyglutarate میں تبدیل کرنے کی نئی صلاحیت کے ساتھ عطا کرتا ہے، جو بالآخر tumorigenesis کا باعث بنتا ہے۔2-ہائیڈرو آکسیگلوٹریٹ کی پیداوار کا سب سے بڑا ذریعہ گلوٹامین ہے، جو کینسر میں، ٹرائی کاربو آکسیلک ایسڈ سائیکل (TCA) ایناپلیروسیس کا بھی ذریعہ ہے۔anaplerosis کا ایک متبادل ذریعہ pyruvate carboxylase (PC) کے ذریعے pyruvate flux ہے، جو عام آسٹروائٹس میں ایک عام راستہ ہے۔اس مطالعے کا مقصد یہ طے کرنا تھا کہ آیا PC IDH1 اتپریورتی خلیوں میں TCA anaplerosis کے ذریعہ کے طور پر کام کرتا ہے جہاں glutamine 2-hydroxyglutarate کی پیداوار کے لیے استعمال ہوتی ہے۔ ہیٹروزائگس اتپریورتی IDH1 یا جنگلی قسم کے IDH1 کے اظہار کے لیے انجینیئر کیے گئے لافانی نارمل انسانی ایسٹروسائٹس کی تحقیقات کی گئیں۔پی سی کے ذریعے اور پائروویٹ ڈیہائیڈروجنیز (PDH) کے ذریعے پائروویٹ کے بہاؤ کا تعین [2-¹³C]گلوکوز سے ماخوذ ¹³C-لیب لیڈ گلوٹامیٹ اور گلوٹامین کے لیبلنگ کی تحقیقات کے لیے مقناطیسی گونج سپیکٹروسکوپی کے ذریعے کیا گیا تھا۔متعلقہ خامروں کے اظہار اور سرگرمی کی تحقیقات کے لیے ایکٹیویٹی اسسیس، RT-PCR اور ویسٹرن بلاٹنگ کا استعمال کیا گیا۔کینسر جینوم اٹلس (TCGA) ڈیٹا کا تجزیہ انسانی گلیوما کے نمونوں میں انزائمز کے اظہار کا جائزہ لینے کے لیے کیا گیا۔ جنگلی قسم کے خلیوں کے مقابلے میں، اتپریورتی IDH1 خلیات نے PC کے ذریعے فریکشنل فلوکس میں نمایاں اضافہ کیا۔یہ پی سی کی سرگرمی اور اظہار میں نمایاں اضافہ سے منسلک تھا۔بیک وقت، PDH کی سرگرمی میں نمایاں کمی واقع ہوئی، ممکنہ طور پر PDH kinase 3 کے ذریعے نمایاں طور پر بڑھتی ہوئی روک تھام PDH فاسفوریلیشن کے ذریعے ثالثی۔ IDH ٹائپ کریں۔ ہمارے نتائج بتاتے ہیں کہ PC اور PDH میں تبدیلیاں IDH1 کے تغیر کے لیے سیلولر موافقت کا ایک اہم حصہ ہو سکتی ہیں اور ممکنہ علاج کے اہداف کے طور پر کام کر سکتی ہیں۔