مصنوعات

LecA (PA-IL) ایک cytotoxic lectin اور adhesin ہے جو Pseudomonas aeruginosa کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے جو ہائیڈرو فوبک galactosides کو اعلی خصوصیت اور تعلق کے ساتھ باندھتا ہے۔بائیوفیلم ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کے lecA-egfp ترجمہ فیوژن اور امیونو بلوٹ تجزیہ کا استعمال کرکے، ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ lecA کا اظہار بائیوفلم سے بڑھے ہوئے خلیوں میں ہوتا ہے۔پولی اسٹیرین اور سٹینلیس سٹیل دونوں پر جامد بائیو فلم اسسیس میں، بائیو فلم کی گہرائی اور سطح کی کوریج کو lecA کے اتپریورتن کے ذریعہ کم کیا گیا تھا اور LecA سے زیادہ پیداواری تناؤ PAO-P47 میں بڑھایا گیا تھا۔پیرنٹ سٹرین، PAO-P47 کے ذریعے بائیوفیلم کی سطح کی کوریج لیکن اسٹیل کوپنز پر lecA اتپریورتی کو بھی isopropyl-beta-D-thiogalactoside (IPTG) یا p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside (IPTG) کی موجودگی میں ترقی سے روکا گیا تھا۔ این پی جی)۔مزید برآں، ان ہائیڈروفوبک گیلیکٹوسائیڈز کی غیر موجودگی میں بننے والی پختہ جنگلی قسم کی بائیو فلمیں آئی پی ٹی جی کے اضافے سے منتشر ہوسکتی ہیں۔اس کے برعکس، p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) جو کہ P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n سے زیادہ تعلق رکھتا ہے کے اضافے کا بائیو فلم کی تشکیل یا بازی پر کوئی اثر نہیں ہوا۔P. aeruginosa PAO1 کی پلینکٹونک نمو IPTG، NPG یا NPF کی موجودگی سے متاثر نہیں ہوئی، اور نہ ہی تناؤ ان شکروں کو کاربن ذرائع کے طور پر استعمال کرنے کے قابل تھا، یہ تجویز کرتا ہے کہ بائیو فلم کی تشکیل پر مشاہدہ شدہ اثرات LecA-ligand کی مسابقتی روک تھام کی وجہ سے تھے۔ پابنداسی طرح کے نتائج اسٹیل کوپنز پر متحرک بہاؤ کے حالات میں اگائے جانے والے بائیو فلموں کے لیے بھی حاصل کیے گئے، جو تجویز کرتے ہیں کہ LecA مختلف ماحولیاتی حالات کے تحت P. aeruginosa biofilm فن تعمیر میں حصہ ڈالتا ہے۔

Arabidopsis پودوں کے پتوں میں xyloglucan oligosaccharides کی سائڈ چین سے t-fucosyl کی باقیات کو چھوڑنے کے قابل الفا-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) کا پتہ چلا ہے۔مزید برآں، SDS-PAGE پر ایک ہی بینڈ پیش کرنے کے لیے گوبھی (Brassica oleracea) کے پتوں سے اسی طرح کی سبسٹریٹ کی خصوصیت کے ساتھ الفا-L-fucosidase کو پاک کیا گیا تھا۔اس پروٹین بینڈ سے دو پیپٹائڈ تسلسل حاصل کیے گئے تھے، اور ان کا استعمال الفا-فوکوسیڈیس کے لیے عربیڈوپسس جین کوڈنگ کی شناخت کے لیے کیا گیا تھا جسے ہم AtFXG1 کال کرنے کی تجویز کرتے ہیں۔اس کے علاوہ، الفا-L-fucosidases کے ساتھ ہومولوجی کے ساتھ Arabidopsis جین بھی پایا گیا ہے، اور ہم نے اسے AtFUC1 کا نام دینے کی تجویز پیش کی۔AtFXG1 اور ATFUC1 دونوں ہیٹرولوجی طور پر Pichia pastoris خلیات اور الفا-L-fucosidase سرگرمیوں میں ظاہر کیے گئے تھے جو ثقافت کے وسط میں مخفی ہیں۔AtFXG1 کے ذریعہ انکوڈ کردہ الفا-L-fucosidase xyloglucan XXFG سے oligosaccharides کے ساتھ ساتھ 2'-fucosyl-lactitol کے خلاف سرگرم تھا لیکن p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside کے خلاف نہیں۔تاہم، اے ٹی ایف یو سی 1 ہیٹرولوجی طور پر ظاہر کیا گیا صرف 2'-فوکوسائل-لیکٹیٹول کے خلاف سرگرم تھا۔اس طرح، سابق کا تعلق xyloglucan میٹابولزم سے ہونا چاہیے۔