ONPG CAS:369-07-3 98.0% کم از کم وائٹ ٹو آف وائٹ پاؤڈر
| کیٹلاگ نمبر | XD90006 |
| سی اے ایس | 369-07-3 |
| پروڈکٹ کا نام | ONPG(2-Nitrophenyl-beta-D-galactopyranoside) |
| مالیکیولر فارمولا | C12H15NO8 |
| سالماتی وزن | 301.25 |
| اسٹوریج کی تفصیلات | 2 سے 8 ° C |
| ہم آہنگ ٹیرف کوڈ | 29400000 |
مصنوعات کی تفصیلات
| پاکیزگی (HPLC) | کم از کم98.0% |
| ظہور | سفید سے آف وائٹ پاؤڈر |
| حل(پانی میں 1٪) | صاف، بے رنگ سے ہلکا پیلا محلول |
| پانی کا مواد(کارل فشر) | زیادہ سے زیادہ0.5% |
| مخصوص نظری گردش [α]D20(c=1, H2O) | - 65.0 ° C سے -73.0 ° C |
ONPG ٹیسٹ (β-galactosidase test) پر بحث
حال ہی میں اکثر سوالات اٹھائے گئے ہیں: 1. تاخیر سے ہونے والے لییکٹوز ابال میں فرق کرنے کے لیے ONPG ٹیسٹ کیوں استعمال کیا جا سکتا ہے؟2. قومی معیار کیوں یہ بیان کرتا ہے کہ ONPG ٹیسٹ کے لیے 3% سوڈیم کلورائد ٹرائیساکرائیڈ آئرن (یا ٹرائیساکرائیڈ آئرن) استعمال کرنا ضروری ہے؟3. Vibrio parahaemolyticus کے لیے، OPNG ٹیسٹ کرواتے وقت، ٹولیون کو معیار کے مطابق ڈراپ وائز کیوں شامل کیا جانا چاہیے؟فنکشن کیا ہے؟
ہماری کمپنی نے بہت ساری معلومات کا جائزہ لیا ہے، اس کا خلاصہ کیا ہے، اور ذیل میں آپ کے ساتھ اس کا اشتراک کیا ہے:
اصول: ONPG کا چینی نام o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside ہے۔ONPG کو β-galactosidase کے ذریعے galactose اور پیلے o-nitrophenol (ONP) میں ہائیڈولائز کیا جا سکتا ہے، لہذا β-galactosidase کی سرگرمی کا پتہ کلچر میڈیم کے رنگ کی تبدیلی سے لگایا جا سکتا ہے۔
لییکٹوز ایک چینی ہے جس کا پتہ لگانے کے لیے زیادہ تر مائکروجنزموں کی ضرورت ہوتی ہے۔اس کے میٹابولزم کے لیے دو خامروں کی ضرورت ہوتی ہے، ایک سیل پرمیس، لییکٹوز پرمیس کے عمل کے تحت خلیوں میں داخل ہوتا ہے۔دوسرا β-galactosidase ہے، جو لییکٹوز کو galactose میں ہائیڈولائز کرتا ہے۔لییکٹوز اور گلوکوز۔β-Galactosidase ONPG پر براہ راست کام کر سکتا ہے تاکہ اسے galactose اور پیلے o-nitrophenol (ONP) میں ہائیڈولائز کر سکے۔یہ 24 گھنٹے میں کیا جا سکتا ہے، یہاں تک کہ لییکٹوز میں تاخیر والے خمیر کے ساتھ۔لہذا، یہ آگر سلنٹ سے کلچر 1 کو چننے اور اسے 36°C پر 1-3h اور 24h کے لیے پورے دائرے میں ٹیکہ لگانے کے مشاہداتی نتائج کی وضاحت کرتا ہے۔اگر β-galactosidase پیدا ہوتا ہے، تو یہ 1-3h میں پیلا ہو جائے گا، اگر ایسا کوئی انزائم نہیں ہے، تو یہ 24h میں رنگ نہیں بدلے گا۔
مندرجہ بالا دو خامروں کے مطابق مائکروجنزموں کو درج ذیل زمروں میں تقسیم کیا جا سکتا ہے۔
1 لییکٹوز فرمینٹنگ (18-24 گھنٹے) بیکٹیریا پرمیس اور β-galactosidase P + G + کے ساتھ؛
2 تاخیر والے لییکٹوز فرمینٹرز (24 گھنٹے سے زیادہ وقت لگتے ہیں) جن میں پرمیس کی کمی ہوتی ہے لیکن ان میں galactosidase ہوتا ہے: P-G+۔
3 نان لییکٹوز فرمینٹرز جن میں پرمیس اور گیلیکٹوسیڈیس دونوں کی کمی ہوتی ہے: P- G-۔
ONPG ٹیسٹ کا استعمال لیکٹوز-لیگ-فرمینٹنگ بیکٹیریا (P-G+) کو نان فرمینٹنگ لییکٹوز بیکٹیریا (PG-) سے ممتاز کرنے کے لیے کیا جا سکتا ہے، جیسے:
1 لیٹ لییکٹوز فرمینٹرز (P-G+) کو نان لییکٹوز فرمینٹرز (P-G-) سے فرق کریں۔
(a) Citrobacter (+) اور Salmonella Arizonae (+) Salmonella (-) سے۔
(b) Escherichia coli (+) Shigella sonnei (-) سے۔
ONPG پرکھ 3% سوڈیم کلورائیڈ فیرک ٹرائیساکرائیڈ (آئرن ٹرائیساکرائیڈ) پر راتوں رات کلچر کا استعمال کرتے ہوئے کیوں کیا گیا؟ہماری کمپنی نے بہت ساری معلومات سے مشورہ کیا ہے، لیکن کوئی واضح بیان نہیں ہے۔صرف ایف ڈی اے کی ویب سائٹ پر یہ لکھا ہے کہ "ٹرپل شوگر آئرن ایگر سلینٹ پر ٹیسٹ کرنے کے لیے کلچروں کو ٹیکہ لگائیں اور 37 ڈگری سینٹی گریڈ (یا دیگر مناسب درجہ حرارت، اگر ضرورت ہو) پر 18 گھنٹے تک انکیوبیٹ کریں۔ % لییکٹوز بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔"مطلب: ٹیسٹ بیکٹیریا کو ٹرائیساکرائیڈ آئرن میڈیم پر ٹیکہ لگایا گیا تھا اور 18 گھنٹے کے لیے 37 ° C پر کلچر کیا گیا تھا۔1% لییکٹوز پر مشتمل غذائیت ایگر سلینٹ (یا دیگر) میڈیم بھی قابل قبول ہیں۔لہذا، یہ اندازہ لگایا جاتا ہے کہ ٹرائیساکرائڈ آئرن میڈیم میں لییکٹوز ہوتا ہے۔راتوں رات ترقی کے بعد، بیکٹیریا نے ایک اچھا فعال β-galactosidase پیدا کیا ہے۔ایسے بیکٹیریا کا استعمال کرتے ہوئے، ONPG کو β-galactosidase کے ذریعے تیزی سے گلایا جا سکتا ہے۔تجرباتی رجحان تیز اور بہتر طور پر ظاہر ہوتا ہے۔اس کے علاوہ، ٹولوئین کا ڈراپ وائز اضافہ اور 5 منٹ کے لیے پانی کا غسل یہ سب β-galactosidase کو مکمل طور پر جاری کرنے کے لیے ہیں۔
