مصنوعات

مائکوبیکٹیریم تپ دق انسانی میزبان میں کئی دہائیوں تک برقرار رہ سکتا ہے۔غیر نامیاتی پولی فاسفیٹ [پولی (P)] پر مشتمل سخت ردعمل کے راستے، جو بالترتیب پولی فاسفیٹ کنیز (PPK) اور exopolyphosphatase (PPX) کے ذریعے ترکیب شدہ اور ہائیڈولائزڈ ہوتے ہیں، یہ خیال کیا جاتا ہے کہ وہ بیکٹیریل استقامت میں کلیدی ریگولیٹری کردار ادا کرتے ہیں۔ہم یہاں دکھاتے ہیں کہ M. تپ دق پولی(P) کا جمع عارضی طور پر بیکلری نمو کی پابندی سے منسلک ہے۔ہم M. tuberculosis Rv1026 کو ایک ناول exopolyphosphatase کے طور پر بھی شناخت کرتے ہیں جس میں لانگ چین پولی(P) کے خلاف ہائیڈرولیٹک سرگرمی ہوتی ہے۔Rv1026 (ppx2) کے اظہار کو دستک دینے کے لیے ٹیٹراسائکلائن-انڈیکیبل ایکسپریشن سسٹم کا استعمال کرتے ہوئے، ہم نے پایا کہ M. تپ دق پولی (P) کا جمع ہونا سست ترقی اور آئیسونازڈ کے لیے حساسیت کو کم کرنے، حرارت اور تیزاب pH کے خلاف مزاحمت میں اضافہ، اور انٹرا سیلولر بقا کو بڑھاتا ہے۔ میکروفیج انفیکشن کے دوران.ٹرانسمیشن الیکٹران مائیکروسکوپی کے ذریعے، ppx2 ناک ڈاؤن سٹرین نے سیل کی دیوار کی موٹائی میں اضافہ کیا، جو کہ خالی ویکٹر کنٹرول کے مقابلے میں ڈرگ ایفلوکس پمپوں کو شامل کرنے یا تبدیل شدہ بائیو فلم کی تشکیل کے بجائے ہائیڈرو فیلک دوائیوں کے لیے سیل وال کی پارگمیتا کے ساتھ منسلک تھا۔ٹرانسکرپٹومک اور میٹابولومک تجزیہ نے ppx2 دستک ڈاؤن کی میٹابولک ڈاون شفٹ کا انکشاف کیا جس کی خصوصیت نقل اور ترجمہ میں کمی اور گلیسرول-3-فاسفیٹ کی سطح میں کمی ہے۔خلاصہ یہ کہ پولی(P) M. تپ دق کی نشوونما کی پابندی اور میٹابولک ڈاون شفٹ میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے اور تبدیل شدہ سیل وال پارگمیبلٹی کے ذریعے اینٹی بائیوٹک رواداری میں حصہ ڈالتا ہے۔ )ppGpp، خیال کیا جاتا ہے کہ وہ مائکوبیکٹیریم تپ دق کے استقامت میں ثالثی کرتا ہے۔اس مطالعے میں، ہم نے ایک نوول انزائم (Rv1026، PPX2) کی نشاندہی کی جو لانگ چین پولی (P) کو ہائیڈولائز کرنے کے لیے ذمہ دار ہے۔ppx2 جین میں جینیاتی طور پر انجنیئرڈ M. تپ دق کے تناؤ کی کمی نے پولی (P) کی سطح میں اضافہ ظاہر کیا، جو بیکٹیریا کی ابتدائی نشوونما سے منسلک تھے اور پہلی لائن کی دوائی isoniazid کے لیے susce ptibility میں کمی کے ساتھ ساتھ تناؤ کی نمائش کے دوران بیکٹیریا کی بقا میں اضافہ ہوا تھا۔ حالات اور میکروفیج کے اندر۔کنٹرول کے تناؤ سے متعلق، اتپریورتی نے سیل کی دیوار کی بڑھتی ہوئی موٹائی اور منشیات کی پارگمیتا کو کم دکھایا۔عالمی جین کے اظہار اور میٹابولائٹ کے تجزیے سے نقل اور ترجمہی مشینری کے اظہار میں کمی اور کاربن ماخذ کے استعمال میں تبدیلی کا انکشاف ہوا۔خلاصہ یہ کہ پولی(P) بیلنس کا ضابطہ M. تپ دق میں مستقل قیام کے لیے اہم ہے۔