مصنوعات

سیروٹک جگر کی بیماریوں جیسے ہیپاٹائٹس سی وائرس (HCV)، آٹومیمون ہیپاٹائٹس (AIH) اور پرائمری بلیری سائروسیس (PBC) میں پیتھوجینک مالیکیولر راستے خراب خصوصیات کے حامل ہیں۔بیماری کے روگجنن میں مختلف جینز اکثر اہم ہوتے ہیں۔Suppression subtractive hybridization (SSH) ایک جینوم وسیع نقطہ نظر ہے جو مختلف طور پر اظہار کردہ mRNA ٹرانسکرپٹس کے لیے افزودہ کرتا ہے۔ہم نے SSH کو مقداری ریئل ٹائم ریورس ٹرانسکرپٹیز پولیمریز چین ری ایکشن (RT-PCR) کے ساتھ مل کر سروسس میں جین کے امتیازی اظہار کے نئے مشاہدات کرنے کا ارادہ کیا۔ایچ سی وی سروسس، اے آئی ایچ سیروسس، پی بی سی، اور غیر بیماری والے جگر کے ٹشوز میں لیور ٹرانسکرپٹومز کا SSH کے ذریعے معائنہ کیا گیا۔نتیجے میں تکمیلی ڈی این اے (سی ڈی این اے) کلون کو ڈاٹ بلاٹ ہائبرڈائزیشن کے ذریعہ امتیازی اظہار کے لئے دوبارہ اسکرین کیا گیا اور پھر ترتیب دیا گیا۔منتخب جین کے اظہار کی مقدار ریئل ٹائم RT-PCR کے ذریعہ کی گئی تھی۔ایس ایس ایچ کے بعد، 694 کلون کو جین کے امتیازی اظہار کے لیے دوبارہ اسکرین کیا گیا، جن میں سے 145 کو ترتیب دیا گیا اور 89 مختلف جینوں سے اخذ کیے گئے۔سات کلون صرف ایکسپریس سیکوینس ٹیگ (EST) سیکوینس انکوڈنگ جینز کے ساتھ ہم جنس تھے جن کا کوئی معلوم فنکشن نہیں تھا۔چار جینوں کے اپ ریگولیٹڈ اظہار کی تصدیق ریئل ٹائم RT-PCR سے ہوئی: ٹرانس میبرن 4 سپر فیملی ممبر 3 (ٹیٹراسپینن CO-029) سروسس کی تمام شکلوں میں، AIH سروسس میں ہیج ہاگ انٹرایکٹنگ پروٹین (HIP) اور chitinase 3-like-1۔ (HC gp-39 یا ykl-40) اور ارجینائن گلوٹامک ایسڈ ریپیٹ (RERE) HCV سروسس میں۔جانچے گئے تمام ٹشوز میں RERE جین پولیمورفزم اور اسپلائس کی مختلف حالتیں دیکھی گئیں۔ٹیٹراسپینن CO-029 اپ ریگولیشن بنیادی طور پر بائل ڈکٹولر خلیوں میں مقامی تھا۔آخر میں، انسانی سائروسیس میں فرق جین کے اظہار کے نئے مشاہدات SSH کو بنیادی دریافت کے آلے کے طور پر استعمال کرتے ہوئے کیے گئے تھے۔خاص طور پر، HCV سے منسلک جگر کی بیماری میں RERE جین اور اس کی مصنوعات کے مزید مطالعے کی تصدیق کی جاتی ہے۔