مصنوعات

ڈی این اے کے اڈوں کو آکسیڈیٹیو نقصان عام طور پر آکسیڈائزڈ پیورینز کی تشکیل کے نتیجے میں ہوتا ہے، خاص طور پر 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) اور 7,8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA) معروف mutagenic گھاو.چونکہ 8-oxoG آسانی سے عام اڈوں کے مقابلے میں مزید آکسیکرن کے تابع ہے، 8-oxoG کی آکسائڈائزڈ شکل کے برعکس DNA ترکیب کے دوران ایک بیس کے اندراج کی تحقیقات وٹرو میں کی گئیں۔سنگل 8-oxoG گھاووں پر مشتمل ایک مصنوعی ٹیمپلیٹ کا علاج پہلے مختلف ون الیکٹران آکسیڈنٹ کے ساتھ یا سنگل آکسیجن حالات میں کیا گیا اور پھر کلینو فریگمنٹ exo- (Kf exo-)، بچھڑے کی تھیمس DNA پولیمریز الفا (پول الفا) کے ذریعے پرائمر ایکسٹینشن کا نشانہ بنایا گیا۔ ) یا انسانی ڈی این اے پولیمریز بیٹا (پول بیٹا)۔پچھلی رپورٹس سے ہم آہنگ، ڈی اے ایم پی اور ڈی سی ایم پی کو تینوں ڈی این اے پولیمریز کے ساتھ 8-آکسو جی کے سامنے منتخب طور پر داخل کیا گیا ہے۔دلچسپ بات یہ ہے کہ، 8-oxoG کا آکسیکرن Kf کے ذریعے گھاو کے مخالف ڈی اے ایم پی اور ڈی جی ایم پی اندراج کو دلانے کے لیے پایا گیا- ترمیم شدہ بیس کی جگہ پر ہونے والی پرائمر ایکسٹینشن کی عارضی روک تھام کے ساتھ۔مزید برآں، پول الفا اور پول بیٹا کے ذریعہ ڈی این اے کی ترکیب کے دوران گھاو ایک بلاک بناتا ہے۔8-oxoA- ترمیم شدہ ٹیمپلیٹ oligonucleotide کے ساتھ تجربات سے پتہ چلتا ہے کہ 8-oxoA اور 8-oxoA کی ایک آکسائڈائزڈ شکل دونوں Kf exo- کے ذریعے dTMP کے براہ راست اندراج کرتے ہیں۔IrCl62 کے ساتھ آکسیڈیشن سے پہلے اور بعد میں 8-oxoG پر مشتمل oligonucleotides کا ماس سپیکٹرو میٹرک تجزیہ- بنیادی طور پر 8-oxoG سائٹ کے آکسیڈیشن کے ساتھ مطابقت رکھتا ہے، جس کے نتیجے میں ایک اہم مصنوعات کے طور پر guanidinohydantoin moiety کی تشکیل ہوتی ہے۔اباسک سائٹس کی تشکیل کا کوئی ثبوت نہیں ملا۔یہ نتائج ظاہر کرتے ہیں کہ 8-oxoG کی ایک آکسائڈائزڈ شکل، ممکنہ طور پر guanidinohydantoin، DNA کی ترکیب کے دوران dNTPs کی غلط پڑھائی اور غلط استعمال کی ہدایت کر سکتی ہے۔اگر ایسا عمل Vivo میں ہوتا ہے، تو یہ ایک نقطہ mutagenic گھاو کی نمائندگی کرے گا جس کی وجہ سے G-->T اور G-->C تبدیلیاں ہوتی ہیں۔تاہم، 8-oxoA کی متعلقہ آکسائڈائزڈ شکل بنیادی طور پر Kf exo- کے ساتھ DNA کی ترکیب کے دوران T کے درست اندراج کو ظاہر کرتی ہے۔